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還沒了解IGF-1試劑盒的看這里！
2020-12-16 瀏覽次數(shù)：1858
IGF-1試劑盒是一種固相的酶聯(lián)免疫實(shí)驗(yàn)，采用爭競法的原理。實(shí)驗(yàn)開始前將病人樣品、標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品先酸化和中和好。包被板的微孔中包被了單克隆抗體，這種單克隆抗體對IGF-1分子上的某單一抗原位點(diǎn)具有特異性。將預(yù)先處理好的樣品與酶聯(lián)物（生物素標(biāo)記的IGF-1）在室溫下溫育。之后洗板，再加入酶復(fù)合物（辣根過氧酶標(biāo)記的鏈親和素）并溫育。加入底物溶液后，溶液所顯示的顏色強(qiáng)度與病人樣品中IGF-1的濃度成反比。
IGF-1試劑盒種屬有人、大鼠、小鼠、猴、兔、豬、馬、魚、雞、鴨、羊等等；樣本包括血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織標(biāo)本等。如何處理IGF-1試劑盒的樣本：
1、血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
2、血漿：應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入10％（v/v）抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1%heparin或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
3、尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4、細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時(shí)，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
5、組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
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