技術文章 / article
接下來說的，熟悉白介素試劑盒的人都知道！
2020-05-27 瀏覽次數(shù)：2153
白介素試劑盒采用雙抗體夾心ELISA法，適用于體外定量檢測人血清、血漿、組織或細胞培養(yǎng)上清液中天然和重組的IL-2濃度。白介素2 (IL-2)主要由絲裂原或抗原激活的T淋巴細胞表達的。它在促進抗原特異性增殖的T細胞克隆增殖中起重要作用。另外，IL-2也參與其他不同種類細胞的多個免疫反應。IL-2刺激胸腺細胞增殖；刺激激活的B細胞增殖與分化；促進單核細胞的生長、分化與細胞殺傷能力；誘導自然殺傷細胞的生長與刺激這些細胞的細胞因子表達以及細胞殺傷能力；增加淋巴激活殺傷細胞(LAK)的產(chǎn)生；誘導少突膠質(zhì)細胞的增殖與分化。人IL-2的cDNA編碼153個氨基酸糖蛋白前體包含20個氨基酸組成的信號肽，成熟時信號肽被剪切掉。在氨基酸水平序列上，小鼠IL-2與人IL-2的序列同源性達60%。人IL-2可以在小鼠細胞中活化，但是小鼠IL-2不能在人細胞中活化。IL-2基因定位在染色體4q位點。
白介素試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人白介素6（IL-6）水平。用純化的人白介素6（IL-6）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入白介素6（IL-6），再與HRP標記的白介素6（IL-6）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素6（IL-6）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中人白介素6（IL-6）濃度。
以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實際濃度。
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